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一分鐘了解離子交換層析介質(zhì)!

更新時(shí)間:2021-04-16 點(diǎn)擊次數(shù):3447

離子交換色譜分離蛋白質(zhì)是根據(jù)在一定pH條件下,蛋白質(zhì)所帶電荷不同而進(jìn)行的分離方法,由基體、配基(離子官能團(tuán))和反離子三部分組成。填料的物理性質(zhì)有:

具備合適的顆粒大小和較窄的粒度分布范圍;

具備一定的機(jī)械強(qiáng)度;

多孔結(jié)構(gòu),有一定的孔徑大小和良好的孔徑分布;

填料的溶脹或收縮現(xiàn)象不能超出所允許的限制范圍;

親水性,不會(huì)對(duì)樣品有不可逆吸附。

 

01 基體

 

基體是填料中的固體支持物部分,賦予填料一定形狀,同時(shí)讓配基固著或鍵合在上面形成色譜填料?;w一般是多孔的、有一定剛性的固體顆粒。

無(wú)機(jī)材料比如硅膠和多孔玻璃類基體,耐壓高、孔徑可控、可制備高效填料,但由于易使蛋白質(zhì)失活和大孔硅膠價(jià)格昂貴而主要用于分析。

有機(jī)材料的基體分兩類:高分子聚合物和聚多糖類。高分子聚合物主要包括苯乙烯和二乙烯基苯聚合物、聚甲基丙烯酸酯和聚酰胺,耐壓較高,但疏水性強(qiáng),孔徑不好控制,一般不用于蛋白質(zhì)制備。聚多糖類主要包括纖維素、葡聚糖和瓊脂糖,這類基體表面電荷呈中性,有大量羥基,親水性強(qiáng),生物相容性好,孔徑易控制,制得的填料柱容量大,但機(jī)械強(qiáng)度差,經(jīng)過(guò)交聯(lián)后可以使強(qiáng)度提高。

 

02 配基(離子官能團(tuán))

 

配基是固定在基體骨架上的功能基團(tuán),它是帶電荷的基團(tuán)(強(qiáng)離子交換劑)或是在溶液中可以離解成帶電荷基團(tuán)的官能團(tuán)(弱離子交換劑)。

①?gòu)?qiáng)陰離子交換劑(SAX),如帶三J胺基乙基的季銨鹽型(簡(jiǎn)稱Q型);

②強(qiáng)陽(yáng)離子交換劑(SCX),如磺酸基丙基(簡(jiǎn)稱SP);

③弱陽(yáng)離子交換劑(WCX),如羧甲基(簡(jiǎn)稱CM),在一定的pH范圍內(nèi)可離解成羧基陰離子(-CH2COO-);

④弱陰離子交換劑(WAX),如二乙胺基乙基(簡(jiǎn)稱DEAE),在一定pH范圍內(nèi)可結(jié)合質(zhì)子離解成季氨陽(yáng)離子[(CH3CH2)2N+H(CH2)2-]。

 

03 反離子

 

與帶電功能基團(tuán)帶相反電荷,可以移動(dòng),能與帶電樣品分子進(jìn)行交換的離子稱為反離子或抗衡離子(也稱為平衡離子)。反離子與固定的帶電基團(tuán)的電荷相反,二者之間以靜電力相結(jié)合。反離子的存在有兩種情況:在強(qiáng)離子交換劑中它已存在;在弱離子交換劑中反離子要在一定的pH溶液中才離解形成。

 

04 月旭離子交換層析介質(zhì)

 

Q/SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速瓊脂糖基架離子交換介質(zhì)

 

 

技術(shù)參數(shù)

 

 

以及:

 

Q/SP Tanrose HP高分辨率瓊脂糖基架離子交換介質(zhì);

Q/SP Tanrose XL高載量瓊脂糖基架離子交換介質(zhì);

Q/SP Tanrose BB大顆粒瓊脂糖基架離子交換介質(zhì);

Solid Q/S/DEAE高剛性瓊脂糖基架離子交換介質(zhì);

Solid Q/SP Mustang高分辨率剛性瓊脂糖基架離子交換介質(zhì);

Solid MMC復(fù)合型弱陽(yáng)離子交換介質(zhì);

Solid MIX A復(fù)合型強(qiáng)陰離子交換介質(zhì);

Solid MMC/MIX A Mustang高分辨率復(fù)合型離子交換介質(zhì);

DEAE/CM Tandex葡聚糖基架離子交換介質(zhì)。

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