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蛋白純化填料解析——葡聚糖與瓊脂糖基質(zhì)

更新時(shí)間:2021-11-11 點(diǎn)擊次數(shù):5176

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今天要給大家介紹一下月旭科技蛋白純化填料中使用的兩種基質(zhì),分別為葡聚糖基質(zhì)與瓊脂糖基質(zhì)。


葡聚糖凝膠

交聯(lián)葡聚糖凝膠是由葡聚糖(dextran,又稱(chēng)右旋糖酐)通過(guò)環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)形成的球形凝膠。交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷的兩個(gè)基團(tuán)分別與兩個(gè)葡聚糖殘基中的游離羥基發(fā)生反應(yīng),使葡聚糖分子內(nèi)或分子之間發(fā)生交聯(lián),形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的微球。葡聚糖是水溶性的,交聯(lián)后才得到非水溶性和具有一定耐壓強(qiáng)度的交聯(lián)葡聚糖凝膠,可直接用于凝膠色譜。合成交聯(lián)葡聚糖時(shí)糖濃度和交聯(lián)劑用量和反應(yīng)條件決定了凝膠的交聯(lián)度和網(wǎng)孔大小,也決定了該填料的耐壓強(qiáng)度和排阻極限。

孔徑小的葡聚糖凝膠(G-10、G-15、G-25、G-50)主要用于脫鹽、肽與其他小分子的分離,通常分子量在100萬(wàn)以上的生物大分子無(wú)法使用葡聚糖凝膠,要用瓊脂糖凝膠,凝膠型號(hào)G后面得數(shù)字粗略表示了10g該類(lèi)型凝膠得吸水值(ml)。


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月旭Tandex G系列

葡聚糖凝膠產(chǎn)品性能

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瓊脂糖凝膠


瓊脂糖是從海洋紅藻中提取的天然高分子化合物,它是由β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖兩種單糖交替連接而成。其中β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖之間通過(guò)β(1→4)糖苷鍵連接,而3,6-脫水-L-半乳糖和β-D-半乳糖之間通過(guò)α(1→3)糖苷鍵連接。瓊脂糖在常溫下是固體,在水中加熱到45℃以上時(shí)溶解,在無(wú)交聯(lián)劑存在時(shí)冷卻能形成凝膠。當(dāng)熱的瓊脂糖溶液(糖濃度2%~16%)進(jìn)行冷卻時(shí),鏈狀分子之間會(huì)先形成雙螺旋,并進(jìn)一步自發(fā)聚集形成束狀結(jié)構(gòu),再進(jìn)一步形成多孔的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的瓊脂糖凝膠。

糖溶液的濃度不同,凝膠的平均孔徑也不同,糖濃度大,凝膠的平均孔徑小,從而用于色譜時(shí)排阻極限也小。高流速的瓊脂糖凝膠耐壓可達(dá)0.3~0.4MPa,基本滿(mǎn)足蛋白質(zhì)大規(guī)模分離的需要。


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