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基礎打好才能走的更遠!來看看固相萃取的基本原理

更新時間:2023-05-08 點擊次數(shù):1246

01 相關術語

1. 預處理(condition):使SPE柱達到萃取的最佳狀態(tài),以便吸附目標化合物。(活化 平衡)

2. 洗滌(wash):目的是將干擾目標化合物分析的雜質在洗脫前去除。(淋洗)

要求:最大限度去除雜質,而對目標化合物沒有明顯損失。     

3. 洗脫(eluton):用適當?shù)娜軇⒛繕嘶衔飶腟PE柱上洗脫出來。

溶劑應選擇:最大限度地將目標化合物洗脫,共洗脫雜質越少越好。

4. 載樣(load):即樣品上樣。樣品載入并通過SPE柱的過程。(上樣)

5. 干擾物(interferences):也稱雜質。是指對目標化合物的萃取或檢測起到負面作用的物質。

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02 基本原理

利用固體吸附劑(填料)對于液體樣品中的目標化合物和干擾化合物進行有選擇地吸附,然后用溶劑洗脫,達到去除干擾或富集目標化合物的目的。

本質:固相吸附劑上官能團與目標化合物的官能團之間的作用力。


項目案例

 液相上的分離 

01 非極性作用力 ——

反相吸附劑/非極性吸附劑/疏水型吸附劑

固相萃取材料官能團上的碳氫鍵與目標化合物的碳氫鍵之間的力——范德華力、色散力。

例:C18(Si-)、C8(Si-)、C4(Si-)、C2(Si-)、PHE(苯基)(Si-)、CH(環(huán)己基)(Si-)、石墨炭黑、多孔石墨化碳、PSD等。通常非極性的反相SPE柱比較適用于從極性基質中萃取分離非極性及中等極性的目標物。

02 極性作用力 ——

正相吸附劑/極性吸附劑

固相萃取材料極性表面與樣品中目標化合物的極性官能團之間的力——氫鍵、誘導力、偶極-偶極相互作用、π-π相互作用等。

常見極性官能團:羥基、胺基、巰基、羰基、芳香環(huán)以及含氧、氮、硫、磷等雜原子基團。

在極性作用力的固相萃取中,樣品的基質多為非極性,目標化合物多含有極性較大的官能團。

例:Si、氧化鋁、Diol(二醇基)、NH2(氨基)、CN(氰基)等;

石墨炭黑和多孔石墨化碳也可以用于對極性化合物的萃取。

03 離子作用力 ——

離子交換型吸附劑

發(fā)生在帶相反電荷的目標物與固相萃取吸附劑官能團之間——靜電吸引;

三種作用力中強度最大、選擇性最好。

有效萃取的條件:

1)環(huán)境的pH必須使目標化合物和吸附劑帶相反電荷;

2)環(huán)境不能含有高濃度的帶有和目標化合物相同電荷的競爭化合物。

例:PSA(Si-)、PRS(Si-)、SAX(Si-)、SCX(Si-)、WCX(Si-)、MCX(PS-DVB-)、MAX(PS-DVB-)、PWAX(PS-DVB-)等。

04 多種作用力 ——

次級相互作用

例:以鍵合硅膠為吸附劑的固相吸附填料(鍵合硅膠本身的硅羥基),GCB/PSA、GCB/NH2等。

05 分子識別機理 ——

免疫親和固相萃?。↖ASPE)

免疫親和柱中含有和目標物抗體結合在一起的凝膠,樣品中的目標毒素經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢的通過親和層析柱,在免疫親和柱內目標物與抗體結合,其他的無關物質不會結合而直接通過免疫親和柱,之后洗滌免疫親和柱wan全除去沒有被結合的其他無關物質。最后加入甲醇將目標物釋放,然后注入到分析儀器中進行進一步的檢測。

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