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質(zhì)譜測定有機(jī)酸拖尾?可能是這個原因!

更新時間:2022-10-21 點(diǎn)擊次數(shù):2044


1

有機(jī)酸的性質(zhì)


有機(jī)酸是指一些有酸性的有機(jī)化合物。最常見的有機(jī)酸是羧酸,其酸性源于羧基(-COOH)。磺酸(-SO3H)、亞磺酸(RSOOH)、硫羧酸(RCOSH)等也屬于有機(jī)酸。有機(jī)酸多溶于水或乙醇,難溶于其他有機(jī)溶劑。


2

拖尾原因

部分有機(jī)酸在C18柱上的保留和分離能力非常的弱,因此需要使用離子作用力對化合物進(jìn)行分離,但是液相質(zhì)譜的流動相體系中因無法加入不揮發(fā)性鹽,且揮發(fā)性離子對試劑(如三氟yi酸等)也會降低質(zhì)譜響應(yīng),無法達(dá)到定量限要求,所以兩性離子柱HILIC-Amphion II就成為了很好的選擇。

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但是在測試中發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物會出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象,調(diào)解pH后依然非常嚴(yán)重,通過取下色譜柱改用兩通后發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物4(L-谷氨酸)與其他目標(biāo)物比多了些保留時間,且拖尾依然嚴(yán)重,推斷液相體系可能污染(之前測試項(xiàng)目流動相體系中含有三氟yi酸,可能發(fā)生殘留),導(dǎo)致了嚴(yán)重的拖尾。

微信截圖_20221021102111.png

3

解決方案

步驟1

取下色譜柱,換上兩通;

步驟2

取下所有流動相瓶,更換為0.1%甲酸水溶液,以0.3mL/min流速沖洗2h;

步驟3

將0.1%甲酸水溶液更換為0.1%氨水溶液,以0.3mL/min流速沖洗2h;

步驟4

將0.1%氨水溶液更換為水溶液,以0.3mL/min流速沖洗2h;

步驟5

將水溶液更換為甲醇溶液,以0.3mL/min清洗2h。

注:清洗期間,液相不連接質(zhì)譜;如果液相體系中還存在其他污染源且按上述清洗效果依然不滿意的情況,可在甲醇清洗后用異丙醇進(jìn)行沖洗,再用甲醇更換體系中的異丙醇溶液。

微信截圖_20221021102121.png

討論:多數(shù)情況下,當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)峰拖尾時,考慮的更多的是液相方法或者色譜柱的問題,很少會去排除液相系統(tǒng)中的污染問題,希望這個案例能給大家在遇到峰拖尾又排查不出原因時,提供一個思路。



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